О.В. ШАТКОВСКАЯ ¹, Д.Р. КАЙДАРОВА ¹, М.Г. ОРАЗГАЛИЕВА ¹, Э.Б. САТБАЕВА ^1,2, С.О. ОСИКБАЕВА ¹, А.Б. КОЙШЫБАЕВА ¹

1. АО «Казахский научно-исследовательский институт онкологии и радиологии», Алматы, Республика Казахстан;
2. КГП на ПХВ «Алматинский Онкологический Центр», Алматы, Республика Казахстан

DOI: https://www.doi.org/10.52532/2521-6414-2023-2-68-15-21

УДК: 616.24-006:575.224.22

Год: 2023 выпуск: 68 номер: 2 страницы: 15-21

Скачать PDF:

АННОТАЦИЯ

Актуальность: В настоящее время молекулярная диагностика немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) в Казахстане включает определение статуса драйверных мутаций EGFR, ALK и статуса PD-L1. Жизненно важная терапия для пациентов с положительным результатом на эту драйверную мутацию в настоящее время затруднена.
Цель исследования – оптимизация методов молекулярно-генетической диагностики пациентов с НМРЛ путем внедрения тестирования ROS1 в Республике Казахстан.
Методы: Исследовался биопсийный и операционный материал пациентов с НМРЛ, фиксированный в 10%-ном забуференном формалине. После первоначальной морфологической диагностики аденокарциномы, определения статуса мутаций EGFR и ALK образцы опухоли с отрицательным статусом EGFR и ALK отбирались для дальнейшего выявления статуса мутации ROS1. Определение статуса мутации ROS1 проводилось двумя методами: первый метод – иммуногистохимический анализ (ИГХ) на платформе Ventana BenchMark Ultra с использованием антитела ROS1 (SP283) и системы визуализации OptiView DAB Detection Kit. По результатам ИГХ образцы с положительными и сомнительными результатами направлялись на полимеразную цепную реакцию с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР), чтобы подтвердить статус мутации ROS1 – второй метод.
Результаты: С 01.01.2022 по 30.09.2022 гг. всего ме­тодом ИГХ исследовано 99 образцов опухолей пациен­тов с EGFR- отрицательной и ALK-отрицательной аде­нокарциномой легкого. Результаты ИГХ-окрашивания расценивали как: 0 (отрицательно) – 59 образцов, 1+ (от­рицательно) – 25 образцов, 2+ (сомнительно) – 12 об­разцов, 3+ (положительно) – 3 образца. Случаи с ≥70% иммуноокрашивания считались положительными. Об­разцы с оценкой окрашивания ИГХ 2+ (сомнительно), 3+ (положительно) и несколько образцов 1+ были отправ­лены на подтверждение ПЦР-тестированием.
Всего с помощью ОТ-ПЦР было протестировано 22 образца; результаты расценены следующим образом: 1 (4%) – положительный, 13 (59%) – отрицательный, 8 (37%) – невалидный.
Заключение: При определении статуса мутации ROS1 с помощью ИГХ было получено большое количество положительных и сомнительных результатов, а при последующем тестировании ОТ-ПЦР – большая доля невалидных результатов. В дальнейшем при выборе методики обнаружения ROS1 для проведения анализов на страновом уровне необходимо оценить экономическую затратную составляющую внедряемых методов, а также сравнить со стандартной валидированной методикой FISH.
Ключевые слова: молекулярно-генетическая диагностика ROS1, рак легкого (РЛ), немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), иммуногистохимия (ИГХ), полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР), флуоресцентная гибридизация in situ (FISH).

Список использованных источников:

1. Кайдарова Д.Р., Шатковская О.В., Онгарбаев Б.Т., Сейсенбаева Г.Т., Ажмагамбетова А.Е., Жылкайдарова А.Ж., Лаврентьева И.К., Саги М.С. Показатели онкологической службы РК, 2021 г. (Статистические и аналитические материалы) / под ред. Д.Р. Кайдаровой. – Алматы, 2022. – 384 с. [Kaidarova D.R., Shatkovskaja O.V., Ongarbaev B.T., Sejsenbaeva G.T., Azhmagambetova A.E., Zhylkaidarova A.Zh., Lavrent’eva I.K., Sagi M.S. Pokazateli onkologicheskoj sluzhby RK, 2021 g. (Statisticheskie i analiticheskie materialy) / pod red. D.R. Kaidarovoy. – Almaty, 2022. – 384 s. (in Russ.)]. https://doi.org/10.52532/1-11-2021-1-384
2. WHO, International Agency for Research on Cancer. Global Cancer Observatory in 2020. Kazakhstan fact sheets. – 2021. https://gco.iarc.fr/today/data/factsheets/populations/398-kazakhstan-fact-sheets.pdf. 29.05.2023.
3. Loo P.S., Thomas S.C., Nicolson M.C., Fyfe M.N., Kerr K.M. Subtyping of undifferentiated non-small cell carcinomas in bronchial biopsy specimens // J. Thor. Oncol. – 2010. – Т. 5. – №. 4. – Р. 442-447. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e3181d40fac
4. National Cancer Institute. Seer Cancer Statistics Review 1975-2017. https://seer.cancer.gov/archive/csr/1975_2017/results_merged/sect_15_lung_bronchus.pdf. 29.05.2023.
5. Lewis D.R., Check D.P., Caporaso N.E., Travis W.D., Devesa S.S. US lung cancer trends by histologic type // Cancer. – 2014. – Т. 120. – №. 18. – Р. 2883-2892. https://doi.org/10.1002/cncr.28749
6. Клинический протокол диагностики и лечения «Рак легкого»: утв. протоколом Объединенной комиссии по качеству медицинских услуг Министерства здравоохранения Республики Казахстан 1 июля 2022 года, №164 [Klinicheskij protokol diagnostiki i lecheniya «Rak legkogo»: utv. protokolom Ob»edinennoj komissii po kachestvu medicinskix uslug Ministerstva zdravooxraneniya Respubliki Kazaxstan 1 ijulya 2019 goda, №164 (in Russ.)]. https://diseases.medelement.com/disease/рак-легкого-кп-рк-2022/17273
7. Stimson L., La Thangue N.B. Biomarkers for predicting clinical responses to HDAC inhibitors // Cancer Let. – 2009. – Т. 280. – №. 2. – Р. 177-183. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2009.03.016
8. Kris M.G., Johnson B.E., Berry L.D., Kwiatkowski D.J., Iafrate A.J., Wistuba I.I., Varella-Garcia M., Franklin W.A., Aronson S.L., Su P.S., Shyr Y., Camidge D.R., Sequist L.V., Glisson B.S., Khuri F.R., Garon E.B., Pao W., Rudin C., Schiller J., Haura E.B., Socinski M., Shirai K., Chen H., Giaccone G., Ladanyi M., Kugler K., Minna J.D., Bunn P.A. Using multiplexed assays of oncogenic drivers in lung cancers to select targeted drugs // JAMA. – 2014. – Vol. 311 (19). – Р. 1998. https://doi.org/10.1001/jama.2014.3741
9. Planchard D., Popat S., Kerr K., Novello S., Smit E.F., Faivre-Finn C., Mok T.S., Reck M., Van Schil P.E., Hellmann M.D., Peters S. Metastatic non-small cell lung cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up // Ann. Oncol. – 2018. – Vol. 29. – Р. iv192-iv237. https://doi.org/10.1093/annonc/mdy474
10. National Comprehensive Cancer Network, Inc. NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines^®) for Non-Small Cell Lung Cancer. – V.3.2023. https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf. 29.05.2023
11. Об утверждении Комплексного плана по борьбе с онкологическими заболеваниями в Республике Казахстан на 2023-2025 годы. Постановление Правительства РК от 29 июня 2018 года, № 395 [Ob utverzhdenii kompleksnogo plana po bor’be s onkologicheskimi zabolevaniyami v Respublike Kazaxstan na 2018 – 2022 gody. Postanovlenie Pravitel’stva RK ot 29 iyunya 2018 goda, № 395 (in Russ.)]. https://adilet.zan.kz/rus/docs/P1800000395. 29.05.2023
12. Об утверждении комплексного плана по борьбе с онкологическими заболеваниями в Республике Казахстан на 2018 – 2022 годы. Утв. Постановлением Правительства РК от 29 июня 2018 года, № 395 [Ob utverzhdenii kompleksnogo plana po bor’be s onkologicheskimi zabolevaniyami v Respublike Kazaxstan na 2018 – 2022 gody. Utv. Postanovleniem Pravitel’stva RK ot 29 iyunya 2018 goda, № 395 (in Russ.)]. https://adilet.zan.kz/rus/docs/P1800000395. 29.05.2023
13. Lin J. J., Shaw A. T. Recent advances in targeting ROS1 in lung cancer // J. Thor. Oncol. – 2017. – Vol. 12 (11). – Р. 1611-1625. https://doi.org/10.1016/j.jtho.2017.08.002
14. Chin L.P., Soo R.A., Soong R., Ou S.H.I. Targeting ROS1 with anaplastic lymphoma kinase inhibitors: a promising therapeutic strategy for a newly defined molecular subset of non–small-cell lung cancer // J. Thor. Oncol. – 2012. – Vol. 7 (11). – С. 1625-1630. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31826baf83
15. Tsao M.S., Hirsch F.R., Yatabe Y. IASLC atlas of ALK and ROS1 testing in lung cancer. Aurora (Colorado). – Aurora, CO, USA: International Association for the Study of Lung Cancer, 2016. https://www.iaslc.org/research-education/publications-resources-guidelines/iaslc-atlas-alk-and-ros1-testing-lung-cancer
16. Lindeman N.I., Cagle P.T., Aisner D.L., Arcila M.E., Beasley M.B., Bernicker E.H., Colasacco C., Dacic S., Hirsch F.R., Kerr K., Kwiatkowski D.J., Ladanyi M., Nowak J.A., Sholl L., Temple-Smolkin R., Solomon B., Souter L.H., Thunnissen E., Tsao M.S., Ventura C. B., Wynes M.W., Yatabe Y. Updated molecular testing guideline for the selection of lung cancer patients for treatment with targeted tyrosine kinase inhibitors: guideline from the College of American Pathologists, the International Association for the Study of Lung Cancer, and the Association for Molecular Pathology // Arch. Pathol. Lab. Med. – 2018. – Vol. 142 (3). – Р. 321-346. https://doi.org/10.5858/arpa.2017-0388-CP
17. Naidoo J., Drilon A. Molecular diagnostic testing in non-small cell lung cancer // Am. J. Hematol. Oncol. – 2014. – Vol. 10 (4). – P. 4-11. https://gotoper-com.s3.amazonaws.com/_media/_pdf/AJHO14Sept_01_NSCLC.pdf
18. Программа RUSSCO «Совершенствование молекулярно-генетической диагностики в Российской Федерации». Практическое руководство для врачей. – 54 с. [Programma RUSSCO «Sovershenstvovanie molekulyarno-geneticheskoj diagnostiki v rossijskoj federacii». Prakticheskoe rukovodstvo dlya vrachej. – 54 s. (in Russ.)]. http://cancergenome.ru/materials/guide.pdf. 06.06.2023
19. Roche. Roche launches first in vitro diagnostic IHC test to detect ROS1 protein in cancers. https://diagnostics.roche.com/nl/en/news-listing/2019/roche-launches-first-in-vitro-diagnostic-ihc-test-to-detect-ros1-protein-in-cancers.html. 29.05.2023.
20. Cha Y.J., Lee J.S., Kim H.R., Lim S.M., Cho B.C., Lee C.Y., Shim H.S. Screening of ROS1 rearrangements in lung adenocarcinoma by immunohistochemistry and comparison with ALK rearrangements // PLoS One. – 2014. – Vol. 9 (7). – Р. e103333. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103333
21. Shan, L., Lian, F., Guo, L., Qiu, T., Ling, Y., Ying, J., Lin, D. Detection of ROS1 gene rearrangement in lung adenocarcinoma: comparison of IHC, FISH and real-time RT-PCR // PLoS One. – 2015. – Т. 10. – №. 3. – Р. e0120422. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0120422
22. Boyle, T. A., Masago, K., Ellison, K. E., Yatabe, Y., Hirsch, F. R. Ros1 immunohistochemistry among major genotypes of Non–Small-Cell lung cancer // Clin. Lung Cancer. – 2015. – Т. 16. – №. 2. – Р. 106-111. https://doi.org/10.1016/j.cllc.2014.10.003
23. Shaw A.T., Ou S.H.I., Bang Y.J., Camidge D.R., Solomon B.J., Salgia R., Riely G.J., Varella-Garcia M., Shapiro G.I., Costa D.B., Doebele R.C., Le L.P., Zheng Z., Tan W., Stephenson P., Shreeve S.M., Tye L.M., Christensen J.G., Wilner K.D., Clark J.W., Iafrate A.J. Crizotinib in ROS1-rearranged non–small-cell lung cancer // New Engl. J. Med. – 2014. – Vol. 371 (21). – Р. 1963-1971. https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/nejmoa1406766
24. Mazières J., Zalcman G., Crinò L., Biondani P., Barlesi F., Filleron T., Dingemans A.C., Léna H., Monnet I., Rothschild S.I., Cappuzzo F., Besse B., Thiberville L., Rouvière D., Dziadziuszko R., Smit E.F., Wolf J., Spirig C., Pecuchet N., Leenders F., Heuckmann J.M., Diebold J., Milia J.D., Thomas R.K., Gautschi O. Crizotinib therapy for advanced lung adenocarcinoma and a ROS1 rearrangement: results from the EUROS1 cohort // J. Clin. Oncol. – 2015. – Vol. 3(9). https://ascopubs.org/doi/10.1200/JCO.2014.58.3302